《表2 tll基因在重组工程菌中的拷贝数》

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《疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶基因在毕赤酵母工程菌中的遗传稳定性》

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将标准质粒pGAP1、pTLL1分别按103、104、105、106、107、108梯度稀释后进行荧光定量PCR扩增，每个浓度梯度设置3次重复，得到一系列Ct值，扩增曲线见图5。标准质粒pGAP1和pTLL1的标准曲线分别为：y=-3.423 1x+79.879（R2=0.999 8）；y=-3.383 4x+79.279（R2=0.999 6），两者的扩增效率相近，分别为95.9%和97.5%。在同一反应条件下，以第1、5、10、15代工程菌基因组DNA为模板进行RT-PCR检测，计算得到每隔5代重组菌的拷贝数，见表2。第1代拷贝数为64.99，传代至第5代拷贝数为17.80，发生了近70%的丢失；第10代和第15代拷贝数为7.00左右，仅保留了第1代10%拷贝数，但此时重组菌中的拷贝数已处于稳定状态。