《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《芪贞归脾汤对淋巴瘤细胞株生物学行为的影响及其机制探讨》

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PIK 3CA:Phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit alpha；NFKB 1:Nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells 1；IKBKB:Inhibitor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells，kinase beta；Bcl-2:B-cell lymphoma-2；JAK 2:Janus k

收集经0和15 mg/mL芪贞归脾汤处理48 h后的Jurkat细胞（以未用芪贞归脾汤处理的细胞作为对照组）；用TRIzol法提取细胞的总RNA，应用Promega M-MLV试剂盒反转录为cDNA。以此cDNA为模板，按照SYBR Premix EX Taq试剂盒提供的操作说明，以GAPDH为内参照，在Roche Light Cycler 480实时荧光定量PCR系统上行PCR扩增，以检测基因表达谱芯片检测中获得的有显著表达差异基因[磷脂酰肌醇3-激酶催化亚单位α（phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit alpha，PIK 3CA）、B细胞κ轻肽基因增强子核因子1（nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells 1，NFKB 1）、B细胞κ轻肽基因增强子抑制因子，激酶β（inhibitor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells，kinase beta，IKBKB）、B细胞淋巴瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Janus激酶2（Janus kinase 2，JAK 2）和信号转导及转录激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT 3）]mRNA的表达水平。引物序列见表1。PCR扩增条件:95℃预变性30 s；95℃变性5 s，60℃退火30 s，共40个循环。每组设置3个复孔。以2-ΔΔCt值表示目的基因的相对表达量。