《表2 克氏原螯虾染色体的相关研究》

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《雌雄克氏原螯虾染色体核型比较分析》

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获得高质量的染色体中期相是进行染色体研究的前提条件，染色体中期相质量会影响后续染色体的研究，如核型分析等。十足目虾蟹类染色体制片可选用的组织较多，如卵、无节幼体、幼虾、中肠、肝胰腺、触角腺、精巢、心和鳃等[12-16]，其中精巢是制备染色体最常用的组织，精巢可以获得大量有丝分裂相及减数分裂相，便于染色体数目的统计。在克氏原螯虾染色体研究中，精巢也被作为研究者制备染色体标本的首选材料（表2）；也有研究者通过对比克氏原螯虾精巢、鳃、再生芽和肝胰腺4种组织，得出再生芽和肝胰腺的效果要优于精巢和鳃[21]。本研究选取克氏原螯虾的触角腺作为制备染色体标本的实验材料，并对常规染色体制备方法进行了以下改进:（1）在取样前，对克氏原螯虾先后注射PHA和秋水仙素，其目的是促进细胞的分裂，并破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期；（2）用0.75%的KCl低渗液低渗处理后加入适量的3∶1卡诺固定液进行预固定，这是因为用低渗液处理后的细胞处于低渗状态，膨胀，易破碎，加入适量的3∶1卡诺固定液可有效防止细胞的破碎；（3）在3∶1卡诺固定液中固定后，再用1∶1卡诺固定液固定30min，有利于染色体充分铺展；（4）将常规方法的滴片改为喷片，加以外力，使染色体在载玻片上彻底分散开。利用此改进的染色体制备方法，雌雄克氏原螯虾均能获得高质量的分裂中期相。