《Table 2 The primers used for real-time PCR》

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《上调CTRP4基因表达通过抑制炎症因子调控食欲调节相关蛋白的表达》


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按照RNA提取试剂盒使用说明书，从N2a细胞中提取总RNA，采用反转录试剂盒合成cDNA，以特异性引物（引物序列见Table 2）进行实时荧光定量PCR反应。RT-PCR利用SYBR Premix Ex TaqⅡ染料在CFX96荧光PCR仪上检测基因的表达。反应体系为:上游引物0.4μL；下游引物0.4μL；cDNA0.8μL；灭菌水3.4μL；SYBR Premix Ex TaqⅡ5μL；总反应体系10μL。反应条件:95.0℃预变性90 s，95.0℃变性15 s，61.0℃退火20 s，68.0℃延伸45 s。40个循环。反应完成后，获得所有标本的扩增曲线、溶解曲线和Ct值（threshold cycle）。每1份标本均设立3个复孔检测，取其平均值计算其相对表达水平。实验重复3次。

图表编号XD0041583000    严禁用于非法目的
绘制时间2019.02.20
作者李悦劼、黄礼义、虞乐华、吴丹冬
绘制单位重庆医科大学附属第二医院康复科、重庆医科大学附属第二医院康复科、重庆医科大学附属第二医院康复科、重庆医科大学附属第二医院康复科
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