《表1 毒力基因exo S和exo U引物序列及产物大小》

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《耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌毒力基因检测及同源性分析》


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毒力基因exoU和exoS PCR检测引物参照文献[3]设计合成。见表1。PCR反应体系为25μL,包括10×缓冲液2.5μL、d NTP(10 mmol/L)0.5μL、Mg Cl2(25 mmol/L)1μL、上、下游引物(10μmol/L)各1μL、DNA模板1μL、Taq DNA聚合酶(5 U/μL)0.25μL、ddH2O17.75μL。PCR反应条件:95℃3 min;95℃30 s,55℃30 s,72℃35 s(exoS)或95 s(exoU),循环35次;72℃10 min。行10 g/L琼脂糖凝胶电泳,用凝胶成像分析系统进行扩增特异性条带拍照分析。