《表1 引物序列及目的产物信息》

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《产吲哚金黄杆菌耐药性和耐药基因研究》


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各耐药基因(IND-1、IND-2、IND-3、IND-4、CIA、IND-LIKE)检测均采用PCR法,其基因引物序列参照文献[2-3]合成。PCR反应的体系(20μL):2×Taq PCR MasterMix加10μL,耐药基因的正反向引物各1μL(10μmol/L),细菌DNA模板2μL,RNase-free water加6μL。PCR反应的条件:94℃条件下DNA预变性5 min,94℃条件下DNA变性1min,Tm 72℃退火1min,72℃条件下延伸1min,25个循环周期,最后在72℃条件下延伸10min。PCR产物用1%琼脂糖凝胶电泳约40min,然后用Bio-Rad凝胶成像仪照相。引物信息见表1。