《表1 目的基因及引物序列》

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《不同剂量抗纤灵方对阿霉素肾纤维化大鼠Ⅰ型胶原基因表达的影响》

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治疗8周后处死大鼠，处死前1天收集24h尿液，留取检测24h尿蛋白定量（24-hour urine protein quantitation，24h-UTP）。处死当天腹主动脉采血3~5mL，1 500r/min离心15min，取500μL上层血清-20℃保存，检测血肌酐（serum creatinine，Scr）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）。取出左肾液氮保存，待行病理切片，检测指标Collα1、Collα2 mRNA。肾组织Masson染色评价肾纤维化，采用彩色多媒体半定量分析系统，每组切片随机选10个视野，每个视野随机测量4个面积内平均灰度值。通过灰度调节区分视野内阳性信号面积，计算阳性目标总面积与统计视野总面积比值，取均值进行统计分析。采用Real-time PCR方法检测Col1α1、Col1α2 mRNA的表达水平。RT-PCR扩增引物设计见表1。