《表1 gyrA、gyrB、parC和parE基因PCR引物序列》

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《环丙沙星耐药的铜绿假单胞菌临床特征及耐药机制》


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根据Gene Bank中公布的gyr A、gyr B、par C和par E基因信息设计引物,见表1。对喹诺酮类药物耐药决定区(quinolone-resistant-determining region,QRDR)进行特异性扩增。聚合酶连(PCR)反应体系为:2*Vazyme Lamp master mix 5μL,dd H2O 3μL,引物工作液1μL,各基因DNA 1μL,共10μL。PCR扩增程序95℃预变性3 min,95℃变性30 s,68℃退火35 s,72℃延伸1 min,循环20次,72℃延伸1 min。得到扩增产物后2%琼脂糖凝胶电泳,见图1。