《表1 实验中合成的引物：橘色双冠丽鱼体色相关基因mc1r的组织表达分析》

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《橘色双冠丽鱼体色相关基因mc1r的组织表达分析》

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选用橘色双冠丽鱼β-actin（登录号NC-023526）作为内参基因，引物β-actin-RT-F和β-actin-RT-R（表1）。根据测得的橘色双冠丽鱼mc1r的cDNA序列设计一对荧光定量PCR引物mc1r-RT-F和mc1r-RT-R（表1），其扩增片段大小约200 bp。分别将β-actin-RT-F和β-actinRT-R，以及mc1r-RT-F和mc1r-RT-R两对引物的PCR扩增产物连接到pMD19-T Vector载体上，并转入大肠杆菌感受态细胞中，经测序比对后，将阳性克隆菌落进行扩大培养，用TIANprep Mini Plasmid Kit（TIANGEN）提取质粒。