《表1 大鼠肝脏组织相关基因的引物序列》

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《褪黑素及其受体激动剂对Mfn2介导的T2DM大鼠肝糖代谢基因的调节作用》

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注:GK为葡萄糖激酶，PEPCK为磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶，G-6-P为葡糖糖-6-磷酸酶，GSK-3β为糖原合成激酶-3β，Mfn2为线粒体融合蛋白2

大鼠处死后，剖取大鼠肝脏组织，称取约20 mg，加Buffer RL试剂600 ml研磨匀浆，提取肝脏组织中的总RNA。将提取的总RNA逆转录为c DNA，反应条件:37℃，15 min；85℃，5 s；-20℃保存。根据Mfn2、GK、PEPCK、G-6-P、GSK-3的基因序列设计引物，见表1。RT-PCR反应条件:95℃，30 s；95℃，5 s；60℃，31 s；共40个循环；-20℃保存。每批模板均同时进行内参β-actin和目的基因的扩增反应。获得数据以RQ=2-ΔΔCT计算mRNA表达量。