《表1 各基因引物序列表:补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝脏Hedgehog通路关键分子表达的影响》

《表1 各基因引物序列表:补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝脏Hedgehog通路关键分子表达的影响》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝脏Hedgehog通路关键分子表达的影响》


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全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬酸氨基转移酶(aspartate aminotransferse,AST)、总胆红素(total bilirubin,TBil)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平。碱水法检测肝组织匀浆羧脯氨酸含量。HE和Masson染色光镜观察肝组织炎症和纤维化程度,诊断标准参照王泰龄等[6]制订的计分方案进行评分。实时荧光定量PCR检测肝组织音刺猬蛋白(sonic Hedgehog,Shh)、12次跨膜蛋白受体1(patched-1,Ptch-1)、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1(glioma-associated oncogene homoglog-1,Gli-1)mRNA水平,以β-actin为内参,相对表达量(2-ΔΔCt)表示目标基因表达量。采用凯基全蛋白抽提试剂盒提取肝组织总蛋白,BCA法进行蛋白定量,Western Blot技术检测肝组织Shh、Ptch-1、Gli-1蛋白表达,以GAPDH为内参。引物由宝生物工程(大连)有限公司设计并合成序列,各基因引物见表1。