《表2 qRT-PCR引物列表》

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《ZmOPR5参与玉米耐镉性生理机制的初步研究》


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总RNA提取采用Trizol试剂盒(Invitrogen,Carlsbad,CA,USA),具体步骤参照说明书进行。采用反转录试剂盒将RNA反转录成cDNA,具体方法参照试剂盒说明书进行。反转录反应结束后,取5μL cDNA原液稀释至25μL用作模板,用内参基因18S rRNA引物作常规PCR检测。采用i TaqTM Universal SYBR?Green Supermix(Bio-Rad,USA)进行实时荧光定量PCR。所有反应体系混合物制备均在冰上完成。使用平均Ct值、ClustalW软件和Treeview用于可视化qRT-PCR数据分析,结果采用5次重复的平均值进行统计分析,ZmOPR5及内参基因的引物信息见表2。