《表1 qRT-PCR引物序列表》

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《miR-124-3p靶向调控MAPK 14对子痫前期大鼠胎盘滋养层细胞增殖及侵袭的影响》


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首先采用经典的TRIzol(Invitrogen,美国)提取总RNA,紫外分光光度计测定OD260/OD280以及总RNA浓度。Primer Script TMRT reagent Kit将1μg总RNA反转录反应获得cDNA。采用实时荧光定量PCR检测相关基因的表达。反应条件为:95℃进行2 min初始变性,随后在95℃变性15 s,60℃退火30 s,最后68℃延伸1 min,扩增35个循环。基因的相对表达量根据2-△△Ct公式计算,GAPDH作为MAPK 14的内参基因,U6作为miR-124-3p的内源性对照。反应中所用的引物如表1所示。