《表2 qRT-PCR引物序列》

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《沉默HIF-1α基因对大鼠BMMSCs在牵张力作用下表达BSP和Osterix的影响》


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将目的细胞分为空白对照组(WT)、HIF-1α基因沉默组(shRNA)、阴性对照组(NC)。以2×105个/mL的细胞密度将P3代BMMSCs接种于Ⅰ型鼠尾胶原包被的BioFlex柔性六孔培养板。细胞融合达到80%~90%后,使用FX-5000T细胞应力加载系统对各组细胞施加频率为1 Hz,拉伸幅度5%,持续时间6 h的机械牵张力(该加力条件为前期实验筛选出的最适力值)。在加力结束后立即收集细胞,Western blot、q RT-PCR分别检测HIF-1α及成骨相关基因BSP和Osterix的蛋白表达及mRNA相对表达量,引物信息见表2。