《表1 HIF-1αshRNA及阴性对照 (HIF-1αNC) 序列信息》

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《沉默HIF-1α基因对大鼠BMMSCs在牵张力作用下表达BSP和Osterix的影响》

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针对大鼠HIF-1α（NM＿024359）的基因序列设计RNA干扰靶点（GCAGACCCAGTTACAGAAACC），根据干扰靶点序列信息设计合成shRNA引物、PCR扩增序列片段。HIF-1αshRNA序列信息和阴性对照（HIF-1αNegative Control，HIF-1αNC）序列信息如表1所示。合成的引物退火形成双链DNAoligo，使用BamHⅠ（GGATTC）、EcoRⅠ（GAATTC）进行双酶切处理，琼脂糖电泳回收。回收产物用T4DNA连接酶连接到经BamHⅠ、EcoRⅠ酶切后的pGMLV-SC1 RNAi慢病毒载体上。连接产物转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞，挑选阳性克隆测序鉴定后进行摇菌培养，提取阳性克隆质粒备用。