《表1 si RNA序列:气道上皮细胞对巨噬细胞表型和吞噬功能的影响及HIF-1α的作用》

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《气道上皮细胞对巨噬细胞表型和吞噬功能的影响及HIF-1α的作用》


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HBE细胞以每孔5.0×105的密度接种培养于不含抗生素的DMEM培养液(含10%SFBS)的24孔板,70%~80%融合后,换无血清培养液用于转染。实验分5组:对照(control)组(不转染)、阴性对照si RNA(negative control si RNA,NC si RNA)组、HIF-1α-Homo-488 si RNA组、HIF-1α-Homo-1216 si RNA组和HIF-1α-Homo-1553 si RNA组。si RNA均由GenePharma合成,序列见表1。转染方法参照Lipofectamine 3000说明书,将5μL si RNA和5μL Lipofectamine 3000分别溶于500μL不含青霉素和链霉素的培养液中,室温静置5 min,混匀,静置20 min后加入24孔板中。24 h后,利用RT-qPCR评估沉默效率。沉默效率最高的用于后续实验。