《表1 引物名称及序列：野生亚侧耳多糖的提取和对巨噬细胞Raw264.7的免疫调节作用研究》

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《野生亚侧耳多糖的提取和对巨噬细胞Raw264.7的免疫调节作用研究》

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HSP（0、12.50、25.00、50.00μg/m L）或LPS（1μg/m L）存在下的巨噬细胞Raw264.7（1×106cell/m L），在24孔细胞培养板上37℃、5%CO2、95%空气条件下培养18 h。收集细胞，用Trizol试剂（Invitrogen，Carlsbad，CA，USA）提取总RNA，-80℃保存备用。以提取的RNA（2μg）为模板，用oligo-（d T）20primer和Superscript III RT（Invitrogen，Carlsbad，CA，USA）制备cDNA，采用Go Taq Flexi DNA聚合酶（Promega Madison）和PCR引物（表1）用PCR技术进行扩增。PCR扩增条件:预变性（94℃，3 min），进行重复变性（94℃，30 s），退火（56℃，40 s）和延伸（72℃，1 min）30次，保温（72℃，10 min）。染色后的PCR产物在1%琼脂糖凝胶上电泳，用凝胶图像分析软件进行扫描和分析（Kodak Digital Science，Kennesaw，GA，USA）。