《表1 引物序列:基于巨噬细胞极化观察白术内酯Ⅱ对胃癌细胞的作用》

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《基于巨噬细胞极化观察白术内酯Ⅱ对胃癌细胞的作用》


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细胞培养与加药同2.4项,收集细胞,以trizol充分裂解细胞,常规方法提取细胞总RNA。用紫外线分光光度仪检测RNA样品浓度及纯度,样品在260,280 nm处的比值,以在1.8~2.0为合格,以RNA为模版逆转录合成c DNA,用PCR仪进行反应,扩增条件:预变性95℃30 s循环1次;95℃5 s,60℃30 s,循环40次;95℃15 s,60℃60 s,95℃15 s,循环1次。采用2-ΔΔCt对PCR结果进行数据分析,计算ΔCt=Ct目的基因-Ct内参基因;ΔΔCt=ΔCt给药组-ΔCt空白组;差别倍数=2-ΔΔCt,其中正常组的数值均为1。检测巨噬细胞中M1型及M2型相关m RNA表达情况。引物序列由英潍捷基(上海)公司设计合成,见表1。