《表1 引物序列：阻断TIM-4分子对M1/M2型巨噬细胞极化及同种异体免疫排斥反应的影响》

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《阻断TIM-4分子对M1/M2型巨噬细胞极化及同种异体免疫排斥反应的影响》

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取“1.4”腹腔和脾细胞提取总RNA，检测纯度，行逆转录合成c DNA。逆转录反应程序:42℃2 min除去基因组DNA，然后37℃15 min，85℃5 s合成c DNA。以c DNA为模板，对上述基因表达水平行PCR反应。miR-21和U6采用专用引物行逆转录，以U6作为检测miR-21内参基因；IL-10、p35、p40和EB病毒诱导基因3（Epstein-Barr virus-induced gene-3，EBi-3）采用逆转录试剂盒中的Oligo d T引物行逆转录，以β-肌动蛋白作为其内参基因。qRT-PCR反应体系为10μL，包括2×SYBR Premix Ex Taq5.0μL，正向和反向引物各0.2μL，c DNA 1μL，无RNA酶双蒸水3.6μL。qRT-PCR主要实验步骤:95℃30 s；95℃5 s，退火30 s；40个循环。采用2-ΔCt方法计算结果。引物序列如表1所示。