《表1 引物序列:烟草诱导的M2型巨噬细胞对肺癌细胞侵袭转移的影响》

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《烟草诱导的M2型巨噬细胞对肺癌细胞侵袭转移的影响》


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取处于对数生长期的THP-1细胞以1×105个/孔接种于6孔板中,分为3组(0%CSE组、2%CSE组和4%CSE组),用不同浓度的CSE分别刺激THP-1细胞96 h。离心收集细胞,将上述不同烟草浓度处理的THP-1细胞,采用Trizol法提取总RNA,按Prime Script RT reagent Kit说明书进行逆转录。获取c DNA后按SYBR Premix Ex Taq、上下游引物、c DNA、蒸馏水分别为5μL、1μL、2μL和2μL配成10μL的反应体系。在荧光定量仪上扩增,按95°C 30 s预变性;再按95°C 5 s,58°C40 s扩增39个循环。统计数据,根据ΔCt值(Cq目地–Cq内参)统计出的2–ΔΔCt值为该基因的相对表达水平。引物序列见表1。