《表2 qRT-PCR引物序列》

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《miR-10b对牛卵巢颗粒细胞凋亡的影响》

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TRIzol法提取牛卵巢颗粒细胞总RNA并反转录为cDNA，用于qRT-PCR检测。本实验所需的引物由上海生工生物工程有限公司合成（表2）。qRT-PCR反应体系20μL:2μL cDNA模板，10μL SYBR Premix Ex Taq II，0.4μL ROX reference Dye II，上游、下游引物各0.8μL（0.4μmol/L），6μL ddH2O。反应程序：95℃30 s；40×（95℃5 s，56～64℃34 s)；95℃15 s，60℃60 s，95°C 15 s。用2-ΔΔCt法计算基因相对表达量，每个样本进行3次重复分析。