《表2 qRT-PCR引物序列及退火温度》

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《不同产源艾纳香油化学成分及其抗炎活性研究》


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按照“1.6”项下方法将小鼠巨噬细胞接种于12孔板中,每孔加入500μL细胞悬液;细胞分组及药物处理方法同“1.6”项,每组3个复孔。培养6 h后,收集细胞,按总RNA提取试剂盒操作说明书提取总RNA;以总RNA为模板,进行反转录得到cDNA;按照qRT-PCR试剂盒操作说明配置反应体系。反应条件:95℃预热5 min;95℃变性30 s,退火(温度见表2) 30 s,72℃延伸30 s,自变性开始3步为1个循环,共40个循环;72℃延伸2 min,使产物延伸完全;55℃~95℃绘制熔解曲线。以GAPDH为内参,结果用Ct值表示,采用2-ΔΔCt法进行相对定量分析。