《表2 PCR引物序列及退火温度》

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《高温堆肥对病死鸡中四环素类抗生素抗性基因的影响》

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对7种四环素类ARGs（即tet A、tet E、tet M、tet O、tet Q、tet W、tet X）进行检测。引物序列主要参照已发表的文献，引物信息见表2[2，5]。PCR反应体系共25μL，包括DNA模板1.0μL，2×Taq PCRMasterMix12.5μL，上下游引物各0.5μL，无菌双蒸水10.5μL。PCR反应程序为:预变性温度为94℃，时间3 min；94℃变性30 s，不同温度（T）退火30 s，72℃延伸30 s，循环30次；72℃保持5 min。PCR反应完成后，取10μL PCR反应产物用2%的琼脂糖凝胶进行电泳，再用凝胶成像分析系统进行拍照分析。