《表1 IGFBP5各分段引物序列及相应的PCR退火温度》

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《IGFBP5基因与鹅肥肝形成及产量的关系研究》

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基因组DNA的提纯方法采用经典的苯酚-氯仿法。纯化的基因组DNA保存于-20℃。为分析IGFPB5的核酸多态性，上述分离的cDNA和基因组DNA样品被用作PCR的模板。cDNA模板用于扩增IGFBP5基因的编码区（CDS）序列，而基因组DNA模板用于扩增IGFBP5基因的上游区域序列。引物设计采用Primer 5.0软件，设计模板序列为鹅IGFBP5基因组序列（GenBank序列号为NW＿013185861.1）和mRNA序列（GenBank序列号为XM＿013196711.1）。引物序列及PCR的退火温度见表1。扩增产物在1%琼脂糖凝胶上电泳分离，在证实为单一条带后送生工生物工程（上海）股份有限公司测序。