《表3 初始样品中ARGs的检出情况》

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《高温堆肥对病死鸡中四环素类抗生素抗性基因的影响》

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PCR产物经电泳检测后，切下目的片段，用DNA纯化回收试剂盒（DP214-03，天根）回收纯化，将目的DNA片段与p MDTM19—T载体连接后，转化至感受态大肠杆菌细胞DH-5α中。提取白斑菌落的重组质粒，37℃培养过夜，经过PCR验证质粒上含有目的基因后送至成都擎科梓熙生物技术有限公司进行测序。利用NCBI数据库中BLAST功能对测序结果进行分析，以进一步验证所获得ARGs的核苷酸序列与基因库中目的基因序列匹配的一致性。用质粒提取试剂盒（DP103-03，天根）提取菌液质粒，用紫外分光光度计测定其浓度，按10倍浓度梯度稀释，然后进行荧光定量PCR试验。反应结果经Bio-Rad IQ5数据分析，以各ARGs拷贝数为横坐标，Ct值为纵坐标绘制标准曲线。