《表3 Western Blot抗体信息》

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《miR-10b对牛卵巢颗粒细胞凋亡的影响》


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RIPA裂解液提取牛卵巢颗粒细胞的总蛋白,根据BCA说明书检测处理样品蛋白浓度。配制12%聚丙烯酰胺凝胶,上样40μg/孔。80 V电压电泳至分离胶,更换电压为160 V,采用半干转法转膜,0.12 A 28 min。使用Intercept?(PBS)Blocking Buffer封闭1.5 h,一抗4℃孵育过夜,TBST洗涤5 min/5次,二抗孵育1 h,TBST洗涤5 min/5次,随后用ECL发光液显影,用Tanon Gis软件进行灰度值分析。抗体信息见表3。