《表1 Western blot及细胞免疫荧光实验用抗体》

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《尼古丁对多种干细胞中烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响》

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采用RIPA裂解缓冲液（并加入PMSF）从细胞中提取总蛋白，用BCA法进行蛋白定量，取30μg蛋白溶解产物进行电泳，然后转到PVDF膜上，条件为恒压110 V、150 min，之后PVDF膜用5%的牛奶在TBST缓冲液中低速摇床上封闭1 h，在4℃条件下与I抗（抗nAChRs各种亚基的抗体）孵育过夜，然后用TBST洗涤3次，在4℃条件下，孵育相对应的II抗，约45 min，取适量A、B两种显影试剂，按照1∶1的比例混合配置成显影液，显影后检测nAChRs蛋白表达情况。以上实验重复3次以上。所用抗体的详细情况见表1。