《表2 Prx基因的引物序列》

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《NNK长期暴露对小鼠毒性和Prx基因表达的影响》

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（1）取试剂盒中需要用的试剂，混匀后置于冰上保存。（2）按照反转录说明书中步骤进行操作，配制反应液（表1），并将其加入无菌、无RNase的EP管中，混匀后离心。（3）放入PCR仪中，设定程序为：25℃，10 min；42℃，30 min；85℃，5 min，终止反应。将PCR产物稀释后于-20℃保存。实时荧光定量PCR是以GAPDH为内参基因，基因引物序列见表2。（4）荧光定量PCR反应条件。取20μL不同反应溶液（表3），混匀，离心，置于PCR仪中进行反应。设置的程序为：a.变性温度95℃，时间30 s；b.循环扩增40次，变性温度95℃、时间5 s，退火温度58～60℃、时间30 s；延伸温度72℃、时间30 s；c.延伸温度72℃，时间5 min。