《表2 基因扩增的引物序列》

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《对海南地区石斑鱼养殖中鱼蛭病的初步研究》

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菲律宾蛭样品DNA是采用标准酚—氯仿抽提法[11]来进行提取的.COI基因、NDI基因和18s r DNA基因扩增引物详见表2[12]，由上海生工生物工程公司合成.PCR反应采用25μL体系:2.5μL的10×PCR buffer；12.5 mmol/L的MgCl2（1.5μL）；10 mmol/L的d NTPs（2μL）；各10μmol/L（1μL）的正反向引物；约50ng的模板DNA；1U的Taq DNA聚合酶；加灭菌蒸馏水至25μL.PCR反应程序:94℃2 min，然后94℃45 s，48℃1 min，72℃1 min，循环35次，最后72℃延伸5 min[13].PCR产物纯化后，由华大基因公司ABIPRISMTM3730 XL DNA Analyzer测序仪完成序列测定工作，测序引物为PCR扩增引物.