《表3 q RT-PCR反应体系组成》
(1)取试剂盒中需要用的试剂,混匀后置于冰上保存。(2)按照反转录说明书中步骤进行操作,配制反应液(表1),并将其加入无菌、无RNase的EP管中,混匀后离心。(3)放入PCR仪中,设定程序为:25℃,10 min;42℃,30 min;85℃,5 min,终止反应。将PCR产物稀释后于-20℃保存。实时荧光定量PCR是以GAPDH为内参基因,基因引物序列见表2。(4)荧光定量PCR反应条件。取20μL不同反应溶液(表3),混匀,离心,置于PCR仪中进行反应。设置的程序为:a.变性温度95℃,时间30 s;b.循环扩增40次,变性温度95℃、时间5 s,退火温度58~60℃、时间30 s;延伸温度72℃、时间30 s;c.延伸温度72℃,时间5 min。
图表编号 | XD00227583300 严禁用于非法目的 |
---|---|
绘制时间 | 2020.08.01 |
作者 | 时桂芹、沈佳鑫、任菲、韩亚伟 |
绘制单位 | 郑州轻工业大学、郑州轻工业大学、郑州轻工业大学、郑州轻工业大学 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |