《表1 q RT-PCR反应的引物参数》

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《萼脊兰FPPS基因的克隆及表达分析》

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根据FPPS基因序列设计出特异性较强的qRT-PCR引物（表1），参照SYBR誖Premix Ex Taq TM II使用说明，利用qRT-PCR的方法检测FPPS基因在萼脊兰不同发育阶段不同器官的表达量，EF1a作为内参基因，计算该基因的相对表达量。目的基因FPPS和内参基因EF1a的退火温度均为58℃，每个样品3次重复，蒸馏水为阴性对照，反应体系20μL，反应程序:95℃预变性30 s，95℃变性15 s，58℃退火15 s，72℃延伸30 s，共41个循环，PCR结果按照相对表达量Rel.Exp=2-ΔΔCt计算，式中ΔCt=Ct（FPPS）-Ct（EF1a RNA），ΔΔCt=（各植物组织ΔcCt）-（花萼ΔCt）。