《表1 q RT-PCR反应引物序列》
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《秀珍菇不同生长阶段在低温刺激后的转录组及差异基因表达分析》
分别提取秀珍菇生长不同阶段总RNA,参考i Script c DNA Synthesis Kit进行c DNA第一链的合成,同时根据二代测序后拼接序列设计引物,按照SYBR Premix Ex Taq TMⅡ使用说明,分别检测2个相邻阶段差异最显著Unigene基因的表达情况:Unigene51871、Unigene27476、Unigene48764、Unigene22380、Unigene71162、Unigene32037、Unigene36538、Unigene33377、Unigene38510、Unigene36510、Unigene22231、Unigene51080,以GAPDH作为内参,计算相对表达量。PCR反应体系20μL,其中Taq酶10μL,上、下游引物各0.4μL,模板1μL,样品设3重复。反应条件:95℃预变性3min,95℃10 s,65℃40 s,40个循环。按照以下公式进行相对表达量计算:目的基因相对表达量=2-ΔΔCt,其中ΔCt=CtUnigene-Ct GAPDH(计算方法参考崔波等,2016)。引物见表1。
图表编号 | XD00224413300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.10.25 |
作者 | 王伟科、陆娜、闫静、宋吉玲、袁卫东、周祖法 |
绘制单位 | 杭州市农业科学研究院、杭州市农业科学研究院、杭州市农业科学研究院、杭州市农业科学研究院、杭州市农业科学研究院、杭州市农业科学研究院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |