《表2 RT-PCR反应体系》

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《宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34a-5p水平检测及临床意义》

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宫颈癌患者分别于手术前以及术后3～4周采集全血，健康体检者体检时采血，两组皆抽取清晨空腹肱静脉血，置于10 ml无菌采血管中，室温静置30 min，4 500 r/min，离心10 min，分离血清，-70℃冻存备用，测定miR-329-3p和miR-34a-5p mRNA浓度和纯度，参照GenBank数据库，获取2个基因多态性位点的序列，设计待测基因位点的PCR扩增引物和单碱基延伸引物，按20μl模板和50μl反应液构成PCR反应体系，扩增程序:95℃5 min；93℃10 s，61℃30 s，重复40个循环，61℃时采集荧光，见表1、表2。实时荧光定量PCR仪检测其表达量。