《表2 相关基因的引物序列》

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采用Trizol法提取组织中总RNA,并用TaKaRa试剂盒将总RNA反转录为cDNA,荧光定量PCR过程采用TaKaRa荧光定量试剂盒进行(所需引物参照Fu等[10],见表2)。PCR具体过程参照Wang等[11]研究所描述,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参基因进行校正,反应体系为20μL,其中SYBR 10μL、上游引物(F)0.5μL、下游引物(R)0.5μL、cDNA 2μL、灭菌水7μL。反应条件为:预变性(50℃,2 min;95℃,10 min),1个循环数;PCR(95℃,15 s;60℃,1 min),40个循环数;熔解曲线(95℃,15 s;60℃,1 min;95℃,15 s),1个循环数。采用2-ΔΔCt方法对目标基因mRNA的相对表达量进行定量。