《表2 成骨相关基因引物序列》

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《MiRNA-503胞内转染对大鼠脂肪干细胞成骨分化的影响》

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注:RUNX2，核心蛋白；BSP，骨涎蛋白；OCN，骨钙素

转染完成后，两组样品均换成成骨诱导液，成骨诱导7 d进行ALP染色和RT-PCR检测。成骨诱导7 d，检测两样本成骨相关基因水平，使用Trizol提取总RNA，测量RNA浓度，定量反转录形成互补脱氧核糖核酸（complementary deoxyribonucleic acid，cDNA），然后进行RT-PCR检测。成骨相关基因引物为RUNX2、BSP、OCN相关引物序列见表2。RT-PCR的反应体系为:2×T5 Fast Qpcr Mix 10μl，上下引物分别为0.5μl，cDNA 1μl，DEPC水8μl，反应体系为20μl体系，扩增条件为95℃5 s、60℃34 s，共40个循环。