《表1 相应成骨基因引物序列》

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《人髌下脂肪垫干细胞的分离培养鉴定及初步研究》

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接种于（nanohydroxyapatite-chitosan-gelatin microscaffolds，HaCGM）HaCG微尺度支架、明胶微尺度支架支架由北京华龛生物科技有限公司提供[6]) ，接种7 d、14 d后提取细胞RNA，实时定量PCR检测成骨诱导基因碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP，），Ⅰ型胶原（collagen type 1，COL1，），成骨细胞转录因子2（runt-relatedtranscription factor 2，RUNX2，）的表达。用TOYOBO公司SYBR Green master Mix试剂盒，在BioRad CFX96实时定量PCR仪检测（BioRad，美国）成骨诱导基因表达:分别提取两组细胞总RNA，经NanoDrop分光光度计（Thermo Fisher，美国）检测吸光值（A值），测RNA浓度，分别按说明完成逆转录。引物信息见表1。设置条件为95℃，15 min；95℃，10 s；60℃，32 s；40个循环；获得熔解曲线。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH，）为内参，比较两组中ALP、COL1、RUNX2的2-△△CT值。