《表1 基因引物序列：丹皮酚对大鼠BMMSCs增殖及成骨向分化的影响》

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《丹皮酚对大鼠BMMSCs增殖及成骨向分化的影响》

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选取BMMSCs成骨相关基因Alp，Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor-2，Runx2），骨钙蛋白（osteocalcin，OCN），骨桥蛋白（osteopontin，OPN）基因，以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde3-phosphate dehydrogenase，Gapdh）为内参进行RT-PCR检测。收集上述培养7天的6孔板细胞，吸去培养基，加入裂解液500μl，5min后收集各样本于无酶EP管中，提取总RNA。使用核酸蛋白分析仪检测A260nm/A280nm的比值及RNA含量确定其纯度。再按照Prime ScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser说明进行反转录，通过所得c DNA完成PCR反应。PCR反应条件：95℃起始变性30 s，进行40个循环（95℃变性5 s，60℃复性31 s），基因引物序列见表1。