《表1 引物序列：基于Cyclin D1基因敲减探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的机理》

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《基于Cyclin D1基因敲减探讨健骨颗粒促进成骨细胞增殖的机理》

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用Trizol法提取细胞总RNA，当OD 260/OD 280值在1.8～2.0时，说明提取的RNA纯度较好。根据反转录试剂盒提供的实验步骤进行反转录，合成Cyclin D1、Cyclin E、CDK 2、CDK 4、Rb及E2F-1扩增引物，根据两步法标准采用实时荧光定量SYBR GREEN PCR法检测扩增程序进行扩增，用参照基因GAPDH对所有样品进行校正，通过7500型实时定量PCR仪软件分析，得到RT-PCR扩增曲线和溶解曲线，并比较组间mRNA的相对含量。引物序列见表1。