《表1 检测成骨相关基因RT-PCR的引物设计》

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《浓缩生长因子对人牙龈成纤维细胞增殖与分化的作用》

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RT-PCR方法检测成骨相关基因的表达:将培养1个月的人牙龈成纤维细胞以细胞浓度为5×108 L-1的细胞悬液接种于10 cm培养板中，共6个培养皿。对照组为MM，实验组为成骨诱导培养基加MM+（体积分数25%，50%，100%）浓缩生长因子萃取液。分别在第3，7，14天3个时间点用Trizol（Invitrogen，美国）法提取RNA并反转录为c DNA，并采用RT-PCR试剂盒（TakaRa，日本）的进行扩增，随后采用实时定量PCR测定成骨相关基因RUNX2和骨钙素的表达，内参基因设为β-Actin。实验所用的检测成骨相关基因表达的引物设计如表1所列[9]。