《表1 MiRNA-503和Negative control CY3相关基因序列》

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《MiRNA-503胞内转染对大鼠脂肪干细胞成骨分化的影响》

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注:MiRNA-503，小分子核糖核酸503；Negative control CY3，阴性对照核苷酸

将已证明具有成骨、成脂能力的ADSC P0代细胞复苏培养至P2代，ADSC以2×105/孔接种至6孔板培养板中，加入2 ml完全培养基，置培养箱中培养24 h以使细胞密度达到60%～80%，实验前2 h将完全培养基更换为α-MEM。实验分为实验组（N组）转染MiRNA-503和对照组（NC组）转染Negative control CY3，相关序列见表1。准备2支EP管（A和B管），A管中加入400μl Opti-MEM+4μl lipo3 000+4μl MiRNA-503，B管中加入400μl Opti-MEM+4μl lipo3 000+4μl Negative control CY3，轻吹3～5次混匀，室温下静置5 min。将混合液分别加入两组细胞培养液中，放置孵箱中继续培养48 h以充分转染。