《表1 本研究中用到的引物》
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《玉米光合基因ZmRbcS1的亚细胞定位及启动子活性分析》
总RNA提取前对所有需要用到的枪头、离心管、研钵和研磨棒等进行高温灭菌和去酶处理,实验使用植物总RNA提取试剂盒(南京诺唯赞生物科技有限公司)提取B73玉米叶片部位的总RNA;反转录同样使用诺唯赞公司的试剂盒;以上步骤均按照试剂盒操作说明进行。c DNA合成后,将其稀释10倍作为模板,使用Primer3web(http://primer3.ut.ee/)设计引物F、R(表1),利用KOD-Plus-高保真酶(东洋纺(上海)生物技术有限公司)进行基因克隆。PCR反应体系(20μL):KOD-Plus-(1 U/μL) 0.4μL,10×PCR Buffer 2μL,25 mmol/L Mg SO41.2μL,2 mmol/L d NTPs 2μL,DMSO 1μL,dd H2O11.6μL,上下游引物(10μmol/L) F和R各1μL,c D‐NA模板1μL。PCR反应程序:95℃预变性5 min,95℃30 s,58℃30 s,68℃35 s,35个循环;68℃7 min,4℃保存。
图表编号 | XD00224403800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.08.25 |
作者 | 江艳平、田秋珍、李红伟、赵国强、汤钰镂、贾双杰、张颖蕾、郭家萌、王泳超、杨青华、邵瑞鑫 |
绘制单位 | 河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室、河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室、河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室、河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室、河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室、河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室、河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室、河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家重点实验室、河南农业大学农学院、省部共建小麦玉米作物学国家 |
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