《表2 拟南芥耐热性相关热激蛋白基因定量分析及酵母单杂交引物对》

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《小麦热激转录因子基因TaHsfA2-12的特性及耐热性调控功能》

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At：拟南芥；Hsp：热激蛋白；ERDJ：内质网DnaJ蛋白3A；Hsa：热胁迫相关蛋白；下同

根据Ta Hsf A2-12基因的引物序列（表1）、内质网Dna J蛋白3A基因（endoplasmic reticulum Dna J3A，At ERDJ3A）、At Hsp21、热胁迫相关蛋白基因（heat stress-associated protein，Hsa32）、Hsp70b和Hsp90.1启动子基因序列（表2后5对）以及插入目的载体的位置设计特异性引物（表1引物6和7），利用高保真PCR聚合酶扩增Ta Hsf A2-12和At Hsps基因并进行胶回收。使用限制性内切酶Eco RⅠ和Bam HⅠ双酶切PGADT7 （AD）载体，限制性内切酶Eco RⅠ和SpeⅠ双酶切p HIS2.1载体后分别连接胶回收产物。使用Clon ExpressⅡ快速克隆技术完成定向克隆，得到质粒AD-Ta Hsf A2-12和p HIS2.1-At Hsps。