《表1 生物被膜相关基因引物及退火温度》

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《食源性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜的形成及相关基因的检测》

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运用PCR技术对上述22株食源性MRSA菌株DNA模板进行15种生物被膜相关基因检测。其中15种生物被膜相关基因包括：调节生物被膜形成基因（sar，agr和sig B）；微生物表面识别粘附基质分子基因（fnb A，fnb B，can，eno，bap，ebp S，fib，bbp，clf A和clf B）和编码ica操纵子基因（ica AD和ica BC）。PCR反应体系如下：DNA模板3μL，10×PCR Buffer2.5μL，Mg Cl2 1.5μL，d NTP 2μL，Taq DNA聚合酶0.125μL、上下游引物各为0.3μL，dd H2O 15.275μL。PCR反应条件如下：95℃预变性5 min；94℃变性1min、退火1 min、72℃延伸1 min，35个循环；72℃终延伸10 min。各引物及退火温度如表1所示。最终将PCR扩增产物上样于含溴化乙锭（EB）的1%(m/V）琼脂糖凝胶，120 V，90 m A条件下电泳30 min，采用凝胶成像系统在紫外光下观察结果。