《表2 荧光定量PCR测试引物》

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《蔗茅耐寒相关基因EfWRKY62的克隆与分析》


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利用荧光定量PCR技术验证TRINITY_DN699-29_c1_g1基因在蔗茅无性系99-3、蔗茅无性系I91-8、滇蔗04-14和ROC10的苗期受到低温胁迫后是否存在基因的表达差异。荧光定量PCR测试引物(表2),F表示正向引物,R表示反向引物,本研究创新地从多种候选内参基因中选用了更适合甘蔗的内参基因25S r RNA,而没有选用常规内参β-actin。在进行荧光定量前,设计引物产物均在150~200 bp,并且进行普通PCR对引物进行测试,在150~200 bp间有一条亮带,没有其它杂带,表明引物均符合进行荧光定量PCR的标准,是具有特异性的引物,灵敏度精确度较高(图1)。