《表2 荧光定量PCR检测引物》

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《转录因子ZBTB18对结直肠癌细胞转移的影响》

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利用SYBR Green PCR Master Mix（4309155，Applied Biosystems）通过ABI 7500Real-Time PCR System（Applied Biosystems，Waltham，MA，USA）来进行定量PCR检测，检测引物见表2。甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）作为内参，每个样品做3个平行，阴性对照中c DNA模板以三蒸水代替。采用ΔΔCt法作相对定量，计算出目的基因在不同细胞中表达量的相对比率。其中Ct值指的是目的基因的量达到域值时所经历的扩增循环数，因此Ct值越大则模板量越小。相对表达量的计算根据下列公式:Ratio=2-ΔΔCt=2-[ΔCt（sample）-ΔCt（control）]。其中ΔCt=Ct（ZBTB18）-Ct（GAPDH），以此除去起始模板量所引起的差异。