《表1 PCR的引物设计序列》

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《蛇床子素对NFATc1基因表达及破骨细胞分化的影响》


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CTSK:组织蛋白酶K;MMP-9:基质金属蛋白酶9;TRAP:抗酒石酸酸性磷酸酶;Integrinβ3:整合素β3;C-SRC:酪氨酸激酶;NFATc1:活化T细胞核转录因子c1;GAPDH:磷酸甘油醛脱氢酶

将生长状态良好的骨髓单核细胞按照1.5×105/cm2的密度接种于12孔板中,实验组加入OST预处理细胞3 h,然后除了阴性组以外更换含25μg/L的M-CSF、100μg/L的RANKL的含药培养基,作用24 h后采用Trizol法提取细胞总RNA,紫外分光光度计检测RNA浓度及纯度,反转录体系、PCR扩增体系均按照说明书设定,反应完成后进行扩展曲线和溶解曲线的分析。目的基因引物序列见表1,以GAPDH为内参校正,采用2-△△Ct法求得目的基因的相对表达水平。