《表1 qRT-PCR引物设计序列》

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《外源6-BA对'美乐'葡萄花色苷合成的影响》

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总RNA提取按照PEXBIO植物果实总RNA抽提试剂盒（北京爱普拜生物有限公司）的说明步骤操作。用Takara PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser（Perfect Real time）试剂盒，以总RNA为模板反转录合成cDNA。选取延伸因子（Elongation Factor，VvEF）为内参基因[19]，引物序列见表1。实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR，qRT-PCR）反应体系25μL：模板DNA1μL（模板质量浓度200ng·μL-1），上、下游引物各0.5μL，2×UltraSYBR Mixture(CW-BIO）12.5μL，ddH2O10.5μL。反应程序：95℃10min，95℃15 s，60℃1 min，40个循环。所有PCR反应设置3次生物学重复，试验结果参照Hashimoto等[20]的方法，用2-ΔΔCt对数据进行定量分析。