《表1 设计的荧光定量PCR引物及其序列》

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《巴氏蘑菇子实体不同发育阶段的转录组分析》


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采用反转录试剂盒TransScript All-in-One First-Strand cDNA Sythesis SuperMix for qPCR(全式金,北京)进行巴氏蘑菇不同样品的总RNA第一链cDNA的合成。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶编码基因GAPDH为内参基因(Wang et al.2014),使用Primer Premier 5.0(Lalitha 2000)设计内参基因以及所选差异表达基因的引物序列(表1),并委托Sangon公司(上海)合成引物。用全世金公司的TransStart TOP Green qPCR试剂盒进行qRT-PCR反应,采用相对定量2–ΔΔCt法对基因表达量进行分析(Livak&Schmittgen2001),反应体系的准备以及反应程序参照试剂盒说明书。