《表1 检测所用引物及磁珠》

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《Luminex x-TAG技术在金黄色葡萄球菌肠毒素快速分型中的应用》

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注:TAG序列可以按对应的磁珠编号在经销商的手册中查询，C12为12个碳基的间隔修饰，Biotin为生物素修饰。

下载Gen Bank登录的金黄色葡萄球菌nuc、fem A基因，以及sea、seb、sec、sed、see各基因序列。用Primer Premier 6.0软件设计金黄色葡萄球菌通用引物:nuc1:5'-GCGATTGATGGTGAT-ACGGTT-3'；nuc2:5'-AGCCAAGCCTTGACGAAC-TAAAGC-3'，fem A1:5'-AAAAAAGCACATAACAA-GCG-3'；fem A2:5'-GATAAAGAAGAAACCAGCAG-3'。并分别设计鉴定金黄色葡萄球菌肠毒素sea、seb、sec、sed、see的特异引物的上游引物和下游引物；根据Luminex公司提供的Mag Plex x-TAG微球清单及其anti-TAG序列，用微球标签引物专用设计软件Tag-It Oligo Design Software v.3.00 （7B052）从引物二聚体，发卡结构，错配情况及GC含量、Tm值等情况进行评价，为每条引物选择合适的磁珠，设计特异引物；最终，所有引物都经过BLAST验证特异性。合成引物时，上游引物的5’端用C12间隔修饰（C12Spacer）连接特定的TAG序列（与anti-TAG序列互补），下游引物的5’端用生物素标记，用来结合SAPE作为荧光标签。引物由上海生工生物合成，全部采用HPLC纯化，序列见表1。