《表1 检测所用引物及磁珠》
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《7种致病性弧菌xTAG液相芯片快速筛查方法的建立》
注:TAG序列可以按对应的磁珠编号在经销商的手册中查询,c12为12个碳基的间隔修饰,Biotin为生物素修饰。
查找相关弧菌鉴定文献,确定各个弧菌的特异性靶基因。下载Gen Bank登录的目的基因序列基因。用Primer Premier 6软件设计特异引物的上下游引物;根据Luminex公司提供的Mag Plex-x TAG微球清单及其anti-TAG序列,用微球标签引物专用设计软件Tag-It Oligo Design Software v.3.00(7B052)从引物二聚体,发卡结构,错配情况及GC含量、Tm值等情况进行评价,为每条引物选择合适的磁珠,设计特异引物;最终,所有引物都经过BLAST验证特异性。合成引物时,上游引物的5'端用C12间隔修饰(C12 Spacer)连接特定的TAG序列(与anti-TAG序列互补),下游引物的5'端用生物素标记,用来结合SAPE作为荧光标签。引物由上海生工生物合成,全部采用HPLC纯化,序列及所用x TAG磁珠编码见表1。
图表编号 | XD00202980600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.10.25 |
作者 | 叶硕、杨元斌、周伟艳、高红 |
绘制单位 | 宁波市疾病预防控制中心微生物检验所、宁波市疾病预防控制中心微生物检验所、宁波市疾病预防控制中心微生物检验所、宁波市疾病预防控制中心微生物检验所 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |